Prensip
Selüloz asetat film elektroforezi, destek olarak selüloz asetat filmi kullanan bir elektroforez yöntemidir.Yüklü parçacıkların elektrik alanının etkisi altında karşıt elektroda doğru hareket etmesi olayına elektroforez denir.Her proteinin belirli bir izoelektrik noktası olduğundan, eğer bir protein, pH'ı izoelektrik noktasından daha düşük olan bir çözeltiye yerleştirilirse, protein pozitif olarak yüklenecek ve negatif elektroda doğru hareket edecektir.Tam tersine pozitif kutba doğru hareket eder.Elektrik alanında hareket eden protein moleküllerinin hızı, yüklerine, moleküllerin şekline ve boyutuna bağlı olduğundan, elektroforez ile farklı proteinler ayrıştırılabilir.Serum, tümü pH 7,5 veya daha düşük izoelektrik noktalara sahip olan çeşitli proteinler içerir.Serum, elektroforezi çalıştırmak için pH 8.6 tamponuna yerleştirildiğinde, tüm serum proteinleri negatif yüklenir ve elektrik alanında pozitif tarafa doğru hareket eder.Çeşitli serum proteinleri aynı pH'ta farklı yüklere sahip olduğundan, moleküler parçacıkların boyutları farklıdır ve dolayısıyla göç hızları farklıdır ve elektroforez ile ayrılırlar.Serum proteinlerinin izoelektrik noktaları ve moleküler ağırlıkları aşağıdaki tabloda gösterilmektedir:
| Protein | İzoelektrik noktalar(PI) | Moleküler ağırlık |
| Albümin | 4.88 | 69 000 |
| α1-gloulin | 5.00 | 200 000 |
| α2-gloulin | 5.06 | 300 000 |
| β-gloulin | 5.12 | 9 000~150 000 |
| γ-gloulin | 6.85~7.50 | 156 000~ 300 000 |
Deney, destek ortamı olarak selüloz asetat membranı (kısaltılmış CAM) kullanarak kan serumundaki farklı proteinleri ayırmaktır.CAM bir çeşit köpüklü gevşektireiyi bir üniforma ile film ve belirli bir su emilimine sahip olan kalınlık 0.1 mm-1.5 mm'dir.
CAM Elektroforezi için malzemeler, aletler ve reaktifler
Örnekler:sağlıklı insan kan serumu
Enstrüman:güç kaynağı DYY-6C, elektroforez tankı DYCP-38C, üstün numune yükleme WD-9404
Reaktifler
1) selüloz asetat membranı 7X9cm
2) PH 8.6 barbitol tampon çözeltisi (iyonik güç 0.05-0.09, 0.06 tid süresidir.): 1,84g Dietil barbitürik asit alın ve ardından 1.03g Dietil sodyum pentobarbital alın, çözünmesi için biraz damıtılmış su ekleyin ve 1000 ml'ye kadar;
3) Leke: Ponceau S 0.2g, Trikloroasetik 3g, 100ml damıtılmış su ekleyin;
4) TBS/T veya PBS/T: 45ml %95 etanol, 5ml buzlu asetik asit, 50ml damıtılmış su ekleyin;
5) Temizleme Solüsyonu: 70ml susuz etanol, 30ml buzlu asetik asit.
Deney Yöntemid
1) Membranı hazırlayın: Membranı 30 dakika ila 8 saat boyunca barbitol tampon çözeltisine batırın ve çıkarın, fazla çözeltiyi emici kağıtla çıkarın.
2) Numunelerin yüklenmesi: Membranın pürüzlü tarafını ve pürüzsüz tarafını ayırt edin ve pürüzlü tarafta üst uca 1,5 cm mesafede bir çizgi işaretleyin.Numuneleri üstün numune yükleme aracıyla pürüzlü taraftan yükleyin.Not: Numuneler membranın pürüzlü tarafına yüklenmelidir.Serum numuneleri membrana tamamen nüfuz ettikten sonra membranı ters çevirin, pürüzlü tarafı (numunelerle birlikte) tanka bakacak şekilde yerleştirin ve numunelerin bulunduğu uç negatif elektrota yerleştirilir.
3) Elektroforez: Güç kaynağını açın, 0,4~0,6m A/cm membran, çalışma süresi 30-45 dakikadır.Elektroforezi çalıştırdıktan sonra gücü kapatın.
4) Lekeleyin ve temizleyin: Membranı tanktan çıkarın ve suya batırın.it 5 dakika boyunca boya solüsyonuna ekleyin ve ardından arka plan rengi berraklaşana kadar 3-4 kez temizleme solüsyonunda tekrar tekrar temizleyin.Serum proteinleri bantlar üzerinde gösterilmelidir ve normalde işaretli çizginin üst ucunu oluşturan beş bölge vardır: Albümin, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin.
5) Koruma: kuru elektroforezi koyunbantTemizleme solüsyonunda 10-15 dakika beklettikten sonra çıkarıp temiz bir bardağa yapıştırın, kuruduktan sonra şeffaf bir film haline gelecektir.bant.
DeneySonuç
Serum örneklerinin ayırma etkisi iyidir ve bant kuyruğu olayı yoktur.Sonuçların tekrarlanabilirliği test prosedürlerine ve deneyi yapan kişinin yöntemlerine bağlı olarak değişiklik gösterir ve tekrarlanabilirliği yüksektir.
Çözüm
Hızlı klinik elektroforez tespit sistemi (Elektroforez tankıDYCP-38C,güç kaynağıDYY-6C ve üstün numune yükleme WD-9404) bizim tarafımızdan üretilmiştir.Pekin Liuyi Biyoteknoloji Co., Ltd şirketiDeneysel gereklilikleri karşılayan,Vesonuçların tekrarlanabilir, basit ve hızlı olması,öğretimaraştırma.
Pekin LiuyiBioteknoloji Co., Ltd, yaşam bilimleri endüstrisi için elektroforez ürünleri üretiminde uzmanlaşmıştır.Çin'de 50 yılı aşkın bir geçmişe sahip olan şirket, dünyanın her yerinde istikrarlı ve yüksek kaliteli ürünler sunabilmektedir.Yıllar süren gelişim sayesinde seçiminize layık!
Artık ortaklar arıyoruz, hem OEM elektroforez tankı hem de distribütörleri memnuniyetle karşılıyoruz.
Hakkımızda daha fazla bilgi için lütfen e-posta yoluyla bizimle iletişime geçin[e-posta korumalı]veya[e-posta korumalı].
Gönderim zamanı: 14 Kasım 2022