giriiş
Jel elektroforezi, moleküler biyolojide proteinlerin, nükleik asitlerin ve diğer makromoleküllerin ayrılmasında yaygın olarak kullanılan temel bir tekniktir. Numune hacminin, voltajın ve elektroforez süresinin uygun kontrolü, doğru ve tekrarlanabilir sonuçlara ulaşmak için çok önemlidir.Laboratuar arkadaşımız teklif ediyorSDS-PAGE jel elektroforezi sırasında bu parametreleri yönetmek için en iyi uygulamalar.
Pekin Liuyi Biyoteknoloji jel elektroforez ürünleri
Örnek Hacmi: Tutarlılığın Sağlanması
SDS-PAGE elektroforezi gerçekleştirirken örnek hacmi, sonuçlarınızın çözünürlüğünü önemli ölçüde etkileyebilecek önemli bir faktördür. Genellikle kuyu başına 10 μL toplam protein yüklenmesi önerilir. Tutarlılığı sağlamak ve bitişik kuyucuklar arasında numune difüzyonunu önlemek için, herhangi bir boş kuyucuğa eşit hacimde 1x yükleme tamponu yüklemek önemlidir. Bu önlem, kuyu boş bırakıldığında oluşabilecek numunelerin komşu şeritlere yayılmasını önlemeye yardımcı olur.
Numunelerinizi yüklemeden önce her zaman bir kuyucuğa moleküler ağırlık işaretçisi ekleyerek başlayın. Bu, elektroforez sonrasında protein boyutlarının kolay tanımlanmasına olanak sağlar.
Gerilim Kontrolü: Hız ve Çözünürlüğü Dengeleme
Elektroforez sırasında uygulanan voltaj, hem numunelerin jelden geçme hızını hem de ayırma çözünürlüğünü doğrudan etkiler. SDS-PAGE için 80V civarında düşük bir voltajla başlamanız tavsiye edilir. Başlangıçtaki bu düşük voltaj, numunelerin yavaş ve eşit bir şekilde hareket etmesine olanak tanır ve ayırıcı jele girerken onları keskin bir bantta yoğunlaştırır.
Numuneler ayırma jeline tamamen girdiğinde voltaj 120V'a yükseltilebilir. Bu daha yüksek voltaj, göçü hızlandırarak proteinlerin moleküler ağırlıklarına göre verimli bir şekilde ayrılmasını sağlar. Elektroforezin tamamlandığını gösteren bromofenol mavisi boya cephesinin ilerlemesinin izlenmesi önemlidir. %10-12 konsantrasyona sahip jeller için 80-90 dakika genellikle yeterlidir; ancak %15'lik jeller için çalışma süresini biraz uzatmanız gerekebilir.
Zaman Yönetimi: Ne Zaman Durdurulacağını Bilmek
Zamanlama jel elektroforezinde bir diğer kritik faktördür. Jelin çok uzun veya çok kısa bir süre çalıştırılması optimum olmayan ayrılmaya yol açabilir. Bromofenol mavisi boyasının migrasyonu yararlı bir göstergedir: jelin dibine ulaştığında genellikle çalışmayı durdurma zamanı gelmiştir. %10-12 gibi standart jeller için yaklaşık 80-90 dakikalık bir elektroforez süresi tipik olarak yeterlidir. %15 gibi daha yüksek yüzdeli jeller için, proteinlerin tamamen ayrılmasını sağlamak amacıyla çalışma süresi uzatılmalıdır.
Arabellek Yönetimi: Arabellekleri Yeniden Kullanma ve Hazırlama
Elektroforez tamponu laboratuvarınızın özel koşullarına bağlı olarak 1-2 kez tekrar kullanılabilir. Ancak en iyi sonuçları elde etmek için taze 10x tampon hazırlanması ve kullanımdan hemen önce seyreltilmesi önerilir. Bu, tamponun etkinliğini korumasını sağlayarak daha güvenilir elektroforez sonuçlarına yol açar.
Pekin Liuyi Biyoteknoloji jel elektroforez ürünleri
Numune hacmini, voltajı ve elektroforez süresini dikkatli bir şekilde kontrol ederek jel elektroforez sonuçlarınızın doğruluğunu ve tekrarlanabilirliğini önemli ölçüde artırabilirsiniz. Bu en iyi uygulamaları laboratuvar çalışmanıza uygulamak, daha net ve daha belirgin bantlar elde etmenize yardımcı olacak ve böylece sonraki analizler için daha iyi verilere yol açacaktır.
Jel elektroforezi deneyini optimize etmek için daha iyi yöntemleriniz varsa, bizimle görüşmeye hoş geldiniz!
Beijing Liuyi Biyoteknoloji Co. Ltd (Liuyi Biyoteknoloji), kendi profesyonel teknik ekibimiz ve Ar-Ge merkezimizle 50 yılı aşkın bir süredir elektroforez aletleri üretiminde uzmanlaşmıştır. Tasarımdan denetime, depoya ve pazarlama desteğine kadar güvenilir ve eksiksiz bir üretim hattımız var. Başlıca ürünlerimiz Elektroforez Hücresi (tank/bölme), Elektroforez Güç Kaynağı, Mavi LED Transilluminatör, UV Transilluminatör, Jel Görüntü ve Analiz Sistemi vb.'dir. Ayrıca laboratuvar için PCR cihazı, vorteks karıştırıcı ve santrifüj gibi laboratuvar cihazlarını da tedarik etmekteyiz.
Ürünlerimiz için herhangi bir satın alma planınız varsa lütfen bizimle iletişime geçmekten çekinmeyin. Bize e-posta yoluyla mesaj gönderebilirsiniz[e-posta korumalı]veya[e-posta korumalı]veya lütfen +86 15810650221 numaralı telefondan bizi arayın veya +86 15810650221 numaralı Whatsapp'ı veya Wechat: 15810650221'i ekleyin.
Lütfen Whatsapp veya WeChat'e eklemek için QR kodunu tarayın.
Gönderim zamanı: Ağu-20-2024