Jel elektroforezi, moleküler biyolojide DNA analizi için kullanılan başlıca yöntemlerden biridir. Bu yöntem, DNA parçalarının bir jel yoluyla taşınmasını ve burada boyut veya şekle göre ayrılmasını içerir. Ancak elektroforez deneyleriniz sırasında agaroz jel üzerinde bantların lekelenmesi veya jel üzerinde bantların olmaması gibi herhangi bir hatayla karşılaştınız mı? Bu hataların nedeni ne olabilir?
Teknisyenlerimiz referans olması amacıyla birkaç sorun giderme işlemini burada özetledi.
1. Agaroz jel üzerine bulaşmış bantlar
●DNA'sı bozuldu. Nükleaz kontaminasyonundan kaçının.
● Elektroforez tamponu taze değil. Elektroforez tamponunun tekrar tekrar kullanılmasından sonra iyonik güç azalır ve pH değeri artar, böylece tampon kapasitesi zayıflar ve bu da elektroforez etkisini etkiler. Elektroforez tamponunun sık sık değiştirilmesi tavsiye edilir.
● Uygun olmayan elektroforez koşulları kullanılmış. Voltajın 20 V/cm'yi aşmasına izin vermeyin ve elektroforez sırasında sıcaklığı <30° C'de tutun. Dev DNA ipliği elektroforezi için sıcaklık <15° C olmalıdır. Elektroforez tamponunun yeterli tampon kapasitesine sahip olup olmadığını kontrol edin.
● Jel üzerine çok fazla DNA yüklenmiştir. DNA miktarını azaltın.
● DNA'da çok fazla tuz var. İleri aşamada fazla tuzları gidermek için etanol çökeltmesini kullanın.
● DNA'ya protein bulaşmıştır. Proteini ileri düzeyde çıkarmak için fenol ekstraksiyonlarını kullanın.
● DNA denatüre edilmiştir. Elektroforezden önce ısıtmayın. 20 mM NaCl ile tampon içinde DNA'yı seyreltin.
2. DNA bandı göçünde anormallikler
● λHind III fragmanının COS bölgesinin renatürasyonu. Elektroforezden önce DNA'yı 65°C'nin altında 5 dakika ısıtın ve ardından 5 dakika boyunca buz ünitesinde soğutun.
● Uygun olmayan elektroforez koşulları kullanılmış. Voltajın 20 V/cm'yi aşmasına izin vermeyin ve elektroforez sırasında sıcaklığı <30° C'de tutun. Elektroforez tamponunun yeterli tampon kapasitesine sahip olup olmadığını kontrol edin.
● DNA denatüre edilmiştir. Elektroforezden önce ısıtmayın. 20 mM NaCl ile tampon içinde DNA'yı seyreltin.
3. Agaroz jel üzerinde DNA bantlarının soluk olması veya hiç olmaması
● Jel üzerine yüklenen DNA'nın miktarı veya konsantrasyonu yetersizdi. DNA miktarını artırın. Poliakrilamid jel elektroforezi agaroz elektroforezinden biraz daha hassastır ve numune yüklemesi uygun şekilde azaltılabilir.
● DNA bozulmuştur. Nükleaz kontaminasyonundan kaçının.
● DNA jelden elektroforeze tabi tutuldu. Jeli daha kısa süre elektroforezleyin, daha düşük bir voltaj kullanın veya daha yüksek yüzdeli bir jel kullanın.
● Etidyum bromür lekeli DNA'nın görüntülenmesi için uygun olmayan W ışık kaynağı kullanıldı. Daha fazla hassasiyet için kısa dalga boylu (254 nm) W ışık kullanın.
4. DNA bantları eksik
●Küçük boyutlu DNA, jelden elektroforeze tabi tutuldu. Jeli daha kısa süre elektroforezleyin, daha düşük bir voltaj kullanın veya daha yüksek yüzdeli bir jel kullanın.
● Benzer moleküllerin DNA bantlarını ayırt etmek zordur. Elektroforez süresini artırın ve konsantrasyonu kontrol edinKullanılacak jel yüzdesinin doğru olduğundan emin olmak için jelin.
● DNA denatüre edilmiştir. Elektroforezden önce ısıtmayın. 20 mM NaCl ile tampon içinde DNA'yı seyreltin.
● DNA iplikçikleri çok büyüktür ve geleneksel jel elektroforezi uygun değildir. Darbe jeli elektroforezinde analiz edin.Agaroz jel elektroforezinde başka hangi sorunlarla karşılaştınız? Gelecekte rehberler için daha fazla araştırma yapacağız.
Beijing Liuyi biyoteknoloji Co., Ltd (Liuyi Biotech), Çin'de elektroforez ile ilgili ürünlere odaklanan uzmanlaşmış bir şirkettir. Hikayesi, Çin'in henüz reform ve açılma zamanına girmediği 1970 yılında başlıyor. Yıllar süren gelişme sayesinde Liuyi Bitotech, elektroforez ürünleri için iç pazarda Liuyi Markası olarak bilinen kendi markasına sahiptir.
Liuyi markasının Çin'de 50 yılı aşkın bir geçmişi vardır ve şirket dünyanın her yerinde istikrarlı ve yüksek kaliteli ürünler sunabilmektedir. Yılların gelişimi sayesinde seçiminize değer!
Liuyi Biotech'in yatay elektroforez hücreleri (tanklar/bölmeler) iyi görünüme sahip, yüksek kalitededir. Farklı boyutlardaki jel tepsileri ile farklı deneysel gereksinimlerinizi karşılayabilirler. Kendi teknik ekibimiz ve fabrikamız var. Tasarımdan üretime, hammaddeden anahtar parçalara kadar tüm süreci kontrol edebiliyoruz. DYCP 31 serisi, model olan DNA elektroforezi içindir.DYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, VeDYCP-31E. Aralarındaki farklar jel boyutları ve fiyatıdır. Müşterilerimize tam boy ürünler sunuyoruz. ModelDYCP-32CEn büyük jeli 250mm * 250mm yapabilir.
Bu arada elektroforez güç kaynağımızı öneriyoruzDYY-6C,DYY-6DVeDYY-10Celektroforez hücrelerimiz (tanklar/odalar) DYCP-31 ve 32 serilerimiz için.
Ürünler hakkında daha fazla bilgi edinmek isterseniz, daha fazlasını almak için lütfen bu web sitesini ziyaret edin ve ne istediğinizi bize bildirmek için e-posta yoluyla bizimle iletişime geçin ve sizin için çözümler sağlayıp sağlayamayacağımızı görün.
Hakkımızda daha fazla bilgi için lütfen e-posta yoluyla bizimle iletişime geçin[e-posta korumalı], [e-posta korumalı].
Gönderim zamanı: Mayıs-09-2022