Comet Testi (Tek Hücre Jel Elektroforezi, SCGE), öncelikle DNA hasarını tespit etmek ve tek tek hücrelerde onarım yapmak için kullanılan hassas ve hızlı bir tekniktir. "Kuyruklu Yıldız Testi" adı, sonuçlarda görünen karakteristik kuyruklu yıldız benzeri şekilden gelmektedir: Hücrenin çekirdeği "baş"ı oluştururken, hasarlı DNA parçaları göç ederek kuyruklu yıldızı andıran bir "kuyruk" oluşturur.
Prensip
Comet Testinin prensibi, DNA parçalarının bir elektrik alanında göçüne dayanmaktadır. Bozulmamış DNA hücre çekirdeği içinde kalırken, hasarlı veya parçalanmış DNA anoda doğru hareket ederek kuyruklu yıldızın "kuyruğunu" oluşturur. Kuyruğun uzunluğu ve yoğunluğu DNA hasarının boyutuyla doğru orantılıdır.
Prosedür
- Hücre Hazırlığı: Test edilecek hücreler düşük erime noktalı agaroz ile karıştırılır ve düzgün bir katman oluşturacak şekilde mikroskop lamları üzerine yayılır.
- Hücre Lizizi: Slaytlar, hücre zarını ve nükleer membranı çıkarmak ve DNA'yı açığa çıkarmak için bir lizis çözeltisine daldırılır.
- Elektroforez: Slaytlar alkali veya nötr koşullar altında bir elektroforez odasına yerleştirilir. Hasarlı DNA fragmanları, elektrik alanının etkisi altında pozitif elektroda doğru göç eder.
- Boyama: Elektroforezden sonra slaytlar, DNA'yı görselleştirmek için bir floresan boyayla (örn. etidyum bromür) boyanır.
- Mikroskobik Analiz: Bir floresan mikroskobu veya özel bir yazılım kullanılarak kuyruklu yıldız şekilleri analiz edilir ve kuyruk uzunluğu ve yoğunluğu gibi parametreler ölçülür.
Biorender'dan resim
Veri Analizi
Comet Testinin sonuçları birkaç önemli parametreye göre değerlendirilir:
- Kuyruk Uzunluğu: DNA hasarının boyutunu gösteren, DNA'nın göç ettiği mesafeyi temsil eder.
- Kuyruk DNA İçeriği: Kuyruğa göç eden DNA yüzdesi; genellikle DNA hasarının niceliksel bir ölçüsü olarak kullanılır.
- Zeytin Kuyruğu Anı (OTM): DNA hasarının daha kapsamlı bir ölçümünü sağlamak için hem kuyruk uzunluğunu hem de kuyruk DNA içeriğini birleştirir.
Uygulamalar
- Genotoksisite Çalışmaları: Comet Testi kimyasalların, ilaçların ve radyasyonun hücre DNA'sı üzerindeki etkilerini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılır ve bu da onu genotoksisite testi için önemli bir araç haline getirir.
- Çevresel Toksikoloji: Çevresel kirleticilerin organizmaların DNA'sı üzerindeki etkisinin analiz edilmesine yardımcı olarak ekosistem güvenliğine ilişkin içgörüler sağlar.
- Tıbbi ve Klinik Araştırma: Comet Testi, DNA onarım mekanizmaları, kanser ve DNA ile ilgili diğer hastalıkların incelenmesinde kullanılır. Ayrıca radyoterapi ve kemoterapi gibi kanser tedavilerinin DNA üzerindeki etkisini de değerlendirir.
- Gıda ve Tarım Bilimleri: Pestisitlerin, gıda katkı maddelerinin ve diğer maddelerin güvenliğini değerlendirmek ve bunların hayvan modellerinde toksik etkilerini incelemek için kullanılır.
Avantajları
- Yüksek Hassasiyet: Düşük düzeydeki DNA hasarını tespit edebilme yeteneğine sahiptir.
- Basit Kullanım: Tekniğin basit olması onu yüksek verimli taramaya uygun hale getiriyor.
- Geniş Uygulama: Hayvan ve bitki hücreleri dahil olmak üzere çeşitli hücre tiplerine uygulanabilir.
- Kantifikasyon Zorlukları: DNA hasarına ilişkin niteliksel veriler sağlarken niceliksel analiz büyük ölçüde yazılım ve görüntü analiz tekniklerine dayanır.
- Deneysel Koşullar: Sonuçlar, deney koşullarının dikkatli kontrolünü gerektiren elektroforez süresi ve pH gibi faktörlerden etkilenebilir.
Sınırlamalar
Comet Testi, DNA hasarını ve onarımını tespit etmedeki esnekliği ve yüksek hassasiyeti nedeniyle biyomedikal araştırma, çevre bilimi ve ilaç geliştirmede paha biçilmez bir araçtır. Pekin Liuyi Biyoteknoloji Co. Ltd (Liuyi Biyoteknoloji)kuyruklu yıldız tahlili için yatay elektroforez odası sunar. Hakkında görüşmek üzere bizimle iletişime geçmekten memnuniyet duyarız.Kuyruklu yıldız tahliliprotokol.
Beijing Liuyi Biyoteknoloji Co. Ltd (Liuyi Biyoteknoloji), kendi profesyonel teknik ekibimiz ve Ar-Ge merkezimizle 50 yılı aşkın bir süredir elektroforez aletleri üretiminde uzmanlaşmıştır. Tasarımdan denetime, depoya ve pazarlama desteğine kadar güvenilir ve eksiksiz bir üretim hattımız var. Başlıca ürünlerimiz Elektroforez Hücresi (tank/bölme), Elektroforez Güç Kaynağı, Mavi LED Transilluminatör, UV Transilluminatör, Jel Görüntü ve Analiz Sistemi vb.'dir. Ayrıca laboratuvar için PCR cihazı, vorteks karıştırıcı ve santrifüj gibi laboratuvar cihazlarını da tedarik etmekteyiz.
Ürünlerimiz için herhangi bir satın alma planınız varsa lütfen bizimle iletişime geçmekten çekinmeyin. Bize e-posta yoluyla mesaj gönderebilirsiniz[e-posta korumalı]veya[e-posta korumalı]veya lütfen +86 15810650221 numaralı telefondan bizi arayın veya +86 15810650221 numaralı Whatsapp'ı veya Wechat: 15810650221'i ekleyin.
Lütfen Whatsapp veya WeChat'e eklemek için QR kodunu tarayın.
Gönderim zamanı: Eylül-20-2024