Agaroz Jel Elektroforezinin Temel Teknikleri(2)

Numune Hazırlama veYükleniyor

Çoğu durumda jel istiflemeden sürekli bir tampon sisteminin kullanılması nedeniyle numunelerin uygun bir konsantrasyona ve küçük bir hacme sahip olması gerekir. Bir kullanınpipetÇözünürlükte önemli bir azalmayı önlemek için numuneyi kuyucuk başına 5-10 μg olacak şekilde yavaşça ekleyin. Ne zamanörnek yükleniyor, güç kaynağı kapatılmalıdır. Numunenin yoğunluğunu arttırmak, numuneyi konsantre etmek ve difüzyonu önlemek için bir gösterge boyası (%0,025 bromofenol mavisi veya turuncu) ve sakaroz (%10-15) veya gliserol (%5-10) içermesi gerekir. Ancak bazen sükroz veya gliserol, elektroforez sonuçlarında U şeklinde bantlara neden olabilir ve bu durum %2,5 Ficoll (polivinilpirolidon) kullanılarak önlenebilir.

1

Elektroforez

Elektroforez voltajı 5-15 V/cm olup genellikle 10 V/cm civarındadır. Büyük moleküllerin ayrılması için voltajın daha düşük olması, genellikle 5 V/cm'yi aşmaması gerekir.

2

Boyama

Floresan boya etidyum bromür (EB), agaroz jeldeki DNA bantlarını gözlemlemek amacıyla boyama için yaygın olarak kullanılır. EB, DNA moleküllerinin baz çiftleri arasına yerleşebilir ve EB'nin DNA'ya bağlanmasına neden olabilir. 260 nm ultraviyole ışığın DNA tarafından emilmesi EB'ye aktarılır ve bağlı EB, görünür ışık spektrumunun kırmızı-turuncu bölgesinde 590 nm'de floresans yayar. Jelin 1 mmol/L MgSO4 çözeltisinde 1 saat süreyle boyanması, bağlanmamış EB'nin neden olduğu arka plan floresansını azaltarak küçük miktarlarda DNA'nın tespitini kolaylaştırabilir.

EB boyasının birçok avantajı vardır: Kullanımı kolaydır, nükleik asitleri kırmaz, yüksek hassasiyete sahiptir ve hem DNA'yı hem de RNA'yı lekeleyebilir. EB numuneye eklenebilir ve herhangi bir zamanda UV emilimi kullanılarak takip edilebilir. Boyamadan sonra EB, n-bütanol ile ekstraksiyon yoluyla uzaklaştırılabilir.

Ancak EB boyası güçlü bir mutajendir ve kullanım sırasında polietilen eldiven giyilmesi gibi önlemler alınmalıdır. Akridin turuncusu da yaygın olarak kullanılan bir boyadır çünkü tek sarmallı ve çift sarmallı nükleik asitleri (DNA, RNA) ayırt edebilir. Çift sarmallı nükleik asitler için yeşil floresans (530 nm) ve tek sarmallı nükleik asitler için kırmızı floresans (640 nm) sergiler. Ayrıca metilen mavisi, metilen yeşili ve kinolin B gibi diğer boyalar da boyama için kullanılabilir.

Beijing Liuyi Biyoteknoloji Co. Ltd (Liuyi Biyoteknoloji), kendi profesyonel teknik ekibimiz ve Ar-Ge merkezimizle 50 yılı aşkın bir süredir elektroforez aletleri üretiminde uzmanlaşmıştır. Tasarımdan denetime, depoya ve pazarlama desteğine kadar güvenilir ve eksiksiz bir üretim hattımız var. Başlıca ürünlerimiz Elektroforez Hücresi (tank/bölme), Elektroforez Güç Kaynağı, Mavi LED Transilluminatör, UV Transilluminatör, Jel Görüntü ve Analiz Sistemi vb.'dir.

3

Artık ortaklar arıyoruz, hem OEM elektroforez tankı hem de distribütörleri memnuniyetle karşılıyoruz.

Ürünlerimiz için herhangi bir satın alma planınız varsa lütfen bizimle iletişime geçmekten çekinmeyin. Bize e-posta yoluyla mesaj gönderebilirsiniz[e-posta korumalı]veya[e-posta korumalı]veya lütfen +86 15810650221 numaralı telefondan bizi arayın veya +86 15810650221 numaralı Whatsapp'ı veya Wechat: 15810650221'i ekleyin.

Lütfen Whatsapp veya WeChat'e eklemek için QR kodunu tarayın.

2


Gönderim zamanı: 20 Aralık 2023