1. Sınıflandırma
Jel elektroforezi dikey tiplere (kolon jelleri ve levha jelleri dahil) ve yatay tiplere (temel olarak levha jelleri) ayrılır (Şekil 6-18). Genel olarak dikey ayırma yataydan biraz daha üstündür ancak yatay jel hazırlamanın en az dört avantajı vardır: tüm jelin altında düşük konsantrasyonlu agaroz kullanımına izin veren bir destek vardır; farklı özelliklerde agaroz jel plakaları hazırlamak mümkündür; jel hazırlama ve numune yükleme daha uygundur; elektroforez odasının yapımı kolay ve uygun maliyetlidir. Yatay elektroforez, agaroz jel plakasının elektroforez tamponunun yüzeyinin yaklaşık 1 mm altına tamamen batırılmasıyla gerçekleştirildiğinden, buna aynı zamanda batık elektroforez olarak da adlandırılır.
Agaroz jel elektroforezi için Elektroforez Tankı DYCP-31DN
2.Tampon Sistemi
Nükleik asit ayırmada çoğu sistem sürekli sistemleri benimser. Yaygın olarak kullanılan elektroforez tamponları arasında TBE (0,08mol/L Tris·HCl, pH 8,5, 0,08mol/L borik asit, 0,0024mol/L EDTA) tamponu ve THE (0,04mol/L Tris·HCl, pH 7,8, 0,02mol/L) bulunur sodyum asetat, 0,0018mol/L EDTA) tamponu. Bu tamponlar genellikle 10x stok çözeltiler halinde hazırlanır ve kullanım sırasında gerekli konsantrasyona kadar seyreltilir. Agaroz jeldeki doğrusal ve dairesel DNA'nın göç oranları, kullanılan tampona göre değişir. THE tamponunda doğrusal DNA'nın göç hızı dairesel DNA'nınkinden daha yüksektir, TBE tamponunda ise bunun tersi doğrudur.
3. Agaroz Jelin Hazırlanması
(1) Yatay Agaroz Jelin Hazırlanması
(a) 1x elektroforez tamponu kullanarak gerekli konsantrasyonda agaroz jeli hazırlayın.
(b) Agarozu kaynayan su banyosunda, manyetik karıştırıcıda veya mikrodalgada çözünmeyi tamamlayana kadar ısıtın. Agaroz çözeltisini 55°C'ye soğutun ve etidyum bromür (EB) boyasını 0,5 μg/ml'lik nihai konsantrasyona ekleyin.
(c) Cam veya akrilik plakaların kenarlarını az miktarda agaroz jel ile kapatın, bir tarak ekleyin ve tarak dişlerini plakanın yaklaşık 0,5~1,0 mm üzerine konumlandırın.
(d) Erimiş agaroz jel solüsyonunu sürekli olarak cam veya akrilik plaka kalıbına dökün (kalınlık, DNA numunesinin hacmine bağlıdır), hava kabarcıklarının oluşmasını önleyin. Oda sıcaklığında doğal olarak katılaşmasına izin verin.
(e) Tamamen katılaştıktan sonra tarağı dikkatlice çıkarın. Jel tankına uygun miktarda elektroforez tamponu ekleyin ve jel plakasının, elektroforez tamponunun yüzeyinin yaklaşık 1 mm altına daldırılmasını sağlayın.
(2) Dikey Agaroz Jelin Hazırlanması
(a) Etanol ile yıkayarak cam plakalardaki gresi veya kalıntıları giderin.
(b) Ara parça plakalarını ön ve arka bentlerin arasına yerleştirin, ara parça plakalarının kenarlarını ön ve arka bentlerle hizalayın ve bunları kelepçelerle sabitleyin.
(c) Jel döküm odasının alt kısmında 1 cm yüksekliğinde bir agaroz tıkacı oluşturmak için aralayıcı plakaların kenarları arasına 1x tamponda %2 agaroz ekleyin.
(d) 1x tamponda hazırlanan istenilen konsantrasyondaki eritilmiş agaroz jeli, üst kısmın 1 cm altına kadar jel odasına dökün.
(e) Hava kabarcıklarının tarak dişlerinin altında kalmasını önleyerek tarağı takın. Bazen agaroz jelin soğutulması sırasında tarak dişlerinde kırışıklıklar oluşabilir; bu gibi durumlarda katılaştırmak için üstüne biraz eritilmiş agaroz ekleyin.
(f) Tarağı çıkarın. Yükleme yuvasında tampon sızıntısını önlemek için agaroz jel plakası ile elektroforez odası arasındaki bağlantıyı %2 agarozla kapatın ve gerekli miktarda tamponu ekleyin.
(g) Jel odasına 1x elektroforez tamponu ekleyin.
(h) DNA örneklerini tamponun altındaki agaroz jeline dikkatlice yükleyin.
Agaroz jel elektroforezi ile ilgili temel bilgiler hakkında daha fazla bilgiyi önümüzdeki hafta paylaşacağız. Bu bilgilerin denemenize yardımcı olmasını dilerim.
Beijing Liuyi Biyoteknoloji Co. Ltd (Liuyi Biyoteknoloji), kendi profesyonel teknik ekibimiz ve Ar-Ge merkezimizle 50 yılı aşkın bir süredir elektroforez aletleri üretiminde uzmanlaşmıştır. Tasarımdan denetime, depoya ve pazarlama desteğine kadar güvenilir ve eksiksiz bir üretim hattımız var. Başlıca ürünlerimiz Elektroforez Hücresi (tank/bölme), Elektroforez Güç Kaynağı, Mavi LED Transilluminatör, UV Transilluminatör, Jel Görüntü ve Analiz Sistemi vb.'dir.
Artık ortaklar arıyoruz, hem OEM elektroforez tankı hem de distribütörleri memnuniyetle karşılıyoruz.
Ürünlerimiz için herhangi bir satın alma planınız varsa lütfen bizimle iletişime geçmekten çekinmeyin. Bize e-posta yoluyla mesaj gönderebilirsiniz[e-posta korumalı]veya[e-posta korumalı]veya lütfen +86 15810650221 numaralı telefondan bizi arayın veya +86 15810650221 numaralı Whatsapp'ı veya Wechat: 15810650221'i ekleyin.
Lütfen Whatsapp veya WeChat'e eklemek için QR kodunu tarayın.
Gönderim zamanı: Aralık-07-2023